Cette Ligne directrice décrit une méthode d'essai en laboratoire, conçue pour évaluer la toxicité aiguë par contact, des pesticides et d'autres produits chimiques, pour des abeilles domestiques ouvrières adultes.

Des abeilles domestiques ouvrières adultes anesthésiées sont exposées à cinq doses (d'une série géométrique) de la substance d'essai, dissoute dans un véhicule approprié (au total un volume de 1 ml), par application directe sur le thorax (aérosol). Au minimum trois groupes d'essai identiques, chacun de dix abeilles, devraient être dosés avec chaque concentration d'essai. Un étalon de toxicité (habituellement diméthoate) devrait être inclus dans la série d'essai. L'essai limite correspond à un niveau de dose de 100 μg de substance active/d'abeille. La durée d'essai est de 48h. La mortalité est enregistrée quotidiennement pendant au moins 48 heures et comparée aux valeurs de contrôle. Si le taux de mortalité augmente entre 24 et 48h tandis que la mortalité des témoins reste à un niveau acceptable, il est approprié de prolonger la durée de l'essai jusqu’à un maximum de 96h. Les résultats sont analysés afin de calculer la DL50 à 24h et 48 h et, dans le cas d’une étude prolongée, à 72 h et 96h.