La présente Ligne directrice (LD) décrit un essai de toxicité aiguë sur un couvain d’abeilles dans des conditions de laboratoire. La méthode vise à déterminer la dose létale (DL50 à 72h) à la suite d'une exposition unique des larves à un produit chimique.

Le premier jour de l'étude (J1), douze larves synchronisées au premier stade larvaire sont retirées du cadre de trois colonies (trente-six larves au total par groupe) et placées individuellement dans des puits d’une plaque à 48 puits où elles reçoivent une quantité normalisée de nourriture artificielle. Le quatrième jour de l'essai (J4), une dose unique du produit chimique testé est ajoutée à la nourriture des larves. Chaque groupe de trente-six larves reçoit une dose distincte dans une série de cinq doses croissantes. Les mortalités sont enregistrées aux jours J5, J6 et J7 de l’essai. La DL50 à 72 h est calculée pour les larves (mortalité cumulée à J7). Le rapport d’étude comprend un certain nombre d’autres informations importantes, notamment concernant les conditions de l’essai (p.ex. la température et l’humidité).